文章摘要: 遼寧PCR負(fù)壓實(shí)驗(yàn)室也叫基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室,PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的縮寫,是一種分子生物學(xué)技術(shù),用于擴(kuò)增特定DNA的片段,可視為一種特殊的DNA體外復(fù)制。通過DNA基因追蹤系統(tǒng),可以快速掌握患者體內(nèi)的病毒含量,其準(zhǔn)確度高達(dá)納米級(jí)。下面我們來看看實(shí)際實(shí)驗(yàn)中要注
遼寧PCR負(fù)壓實(shí)驗(yàn)室也叫基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室,PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的縮寫,是一種分子生物學(xué)技術(shù),用于擴(kuò)增特定DNA的片段,可視為一種特殊的DNA體外復(fù)制。通過DNA基因追蹤系統(tǒng),可以快速掌握患者體內(nèi)的病毒含量,其準(zhǔn)確度高達(dá)納米級(jí)。下面我們來看看實(shí)際實(shí)驗(yàn)中要注意的一些問題。
遼寧PCR負(fù)壓實(shí)驗(yàn)室污染源
樣品間的交叉感覺
采集樣品的容器被污染或樣品密封不嚴(yán),造成溢出;移液不同樣品時(shí),忘記更換槍頭或不使用帶濾芯的槍頭;移液器等實(shí)驗(yàn)室儀器和耗材未及時(shí)消毒滅菌;當(dāng)不同樣品同時(shí)打開,或劇烈搖動(dòng)樣品并反復(fù)吹吸時(shí),氣溶膠形成并擴(kuò)散,發(fā)生交叉污染。
實(shí)驗(yàn)試劑污染
主要是在PCR組分試劑的加樣過程當(dāng)中,移液器、容器、陰性質(zhì)控品等試劑被核酸模板或陽性質(zhì)控品污染。在加樣過程當(dāng)中,由于PCR試劑對(duì)溫度非常敏感,需要用冰浴將PCR試劑和PCR板/管保持在0℃,但這一過程也充滿了污染風(fēng)險(xiǎn)。
擴(kuò)增產(chǎn)物污染
大量拷貝產(chǎn)物的泄漏或擴(kuò)增后PCR反應(yīng)管的意外打開是PCR反應(yīng)中重要也是普遍的污染問題。由于PCR產(chǎn)物的拷貝數(shù)很大,遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于PCR檢測幾個(gè)拷貝的極限,所以極少量的PCR產(chǎn)物就可能造成假陽性。
PCR負(fù)壓實(shí)驗(yàn)室污染應(yīng)急處理方法
如果核酸樣品溢出
立即用布或紙巾蓋好,從外圍向中心倒10%次氯酸消毒液,約30分鐘后,將污染物品取出,再用次氯酸消毒液擦拭,噴75%酒精,移動(dòng)紫外線車定點(diǎn)照射1小時(shí)。
其他未知污染
1.暫停所有實(shí)驗(yàn)操作;
2.清理實(shí)驗(yàn)室所有物品,尋找污染源;
3.增加實(shí)驗(yàn)室的通風(fēng);
4.對(duì)實(shí)驗(yàn)室的所有表層(桌子、地板和墻壁)進(jìn)行消毒;
5.用75%酒精進(jìn)行空氣噴霧;
6.打開紫外線消毒裝置,延長紫外線照射時(shí)間(4小時(shí)以上);
7.上述措施應(yīng)每天進(jìn)行,直至污染消除;使用確認(rèn)無污染的新試劑和設(shè)備進(jìn)行原污染項(xiàng)目的試劑空白檢測,連續(xù)三次陰性結(jié)果后方可進(jìn)行常規(guī)檢測。
遼寧PCR負(fù)壓實(shí)驗(yàn)室的污染來源都有哪些
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